Revista Científica Altoandina de Ciencias Agrarias 1 (1) (2025) 83 Polifenoles t otales del e xtracto h idroalcohólico de la p lanta m edicinal de p isca pisca ( Columellia o b ovata ) Total P olyphenols f rom the H ydroalcoholic E xtract of the M edicinal P lant P isca P isca ( Columellia o b ovata ) Cesar Augusto Bautista - Trillo 1 , Sandy Vialid Yauricasa - Tornero 1 , Yertsin Riveros - Quiñones 1 , Dianet Olibel Sanchez - Huaycha 1 , Oliver Taype - Landeo 2 1 Universidad Nacional de Huancavelica, Huancavelica, Perú 2 Universidad Nacional Autónoma de Tayacaja Daniel Hernández Morillo, Huancavelica, Perú Autor de correspondencia: Oliver Taype - Landeo Historial del artículo : Recibido el 9 de abril de 2025 | A ceptado el 10 de mayo de 2025 | P ublicado el 20 de junio de 2025 RESUMEN Se realizaron un estudio de polifenoles totales de la p isca pisca ( Columellia obovata ) y crece en la regi ó n andina del Perú , siendo considerada por los pobladores locales, una planta medicinal nativa reconocida por su valor en tratar los diversos malestares y rico en polifenoles cuan t o al hidroalcoh ó lico . El objetivo fue determinar el contenido de polifenoles totales en su extracto hidroalcohólico de la planta medicinal de p isca pisca ( Columellia obovata ) . Metodología, fue l a recolecci ó n de muestra en la comunidad de Allpas, provincia de Acobamba, y enviada para su identificación taxonómica al Museo de Historia Natural de la UNMSM . El contenido de polifenoles totales se evaluó mediante el método de Folin - Ciocalteu. Resultados, se encuestaron 49 % de varones y 51 % de mujeres, donde indicaron que el 66,67 % s í conocen la planta de p isca pisca, el 95,65 % utilizan en infusi ó n, el 61,54 % utilizan para el malestar de gripe y 79,17 % lo emplean como medicina alternativa, en su mayoría lo utlizan de manera ocacional y lo utilizan para fumigar las plantas. Respecto al contenido de polifenoles totales fue 691,51 µg/g. Conclusión, los pobladores de zonas altoandinas tienen conocimientos ancentrales propias en el uso de plantas medicinales, para tratar los diversos malestares, y respecto al hidroalcoh ó lico presenta un valor significativo de polifenoles totales. Palabras clave: e xtracto hidroalcohólico ; saberes ancestrales ; taxonomía; vegetales; zonas andinas ABSTRACT A study of total polyphenols from p isca pisca ( Columellia obovata ) was conducted, which grows in the Andean region of Peru. It is considered by local residents to be a native medicinal plant recognized for its value in treating various ailments and rich in hydroalcoholic polyphenols. The objective was to determine the t otal polyphenol content in its hydroalcoholic extract of the medicinal plant p isca pisca ( Columellia obovata ). The methodology involved collecting samples from the community of Allpas, Acobamba province, and sending them to the Natural History Museum of th e UNMSM for taxonomic
C . A . Bautista - Trillo , S . V . Yauricasa - Tornero , Y . Riveros - Quiñones , D . O . Sanchez - Huaycha , & O . Taype - Landeo 84 identification. The total polyphenol content was evaluated using the Folin - Ciocalteu method. Results: 49 % of men and 51 % of women were surveyed, where they indicated that 66,67 % do know the p isca pisca plant, 95,65 % use it as an infusion, 61,54 % use it for flu discomfort and 79,17 % use it as an alternative medicine, mostly using it occasionally and using it to fumigate plants. Regarding the total polyphenol content, it was 691,51 µg / g. Conclusion, the inhabitants of high Andean areas have their own ancestral knowledge in the use of medicinal plants to treat various ailments, and regarding hydroalcoholic it presents a significant value of total polyphenols. Keywords: h ydroalcoholic extract; ancestral knowledge; taxonomy; plants; Andean areas INTRODUC CIÓN La provincia de Acobamba , en la región de Huancavelica, en la zona andina del Per ú , presenta gran diversidad de plantas medicinales que crecen de manera silvestre ; por lo tanto, los pobladores locales tienen uso y conocimiento ancestral de estas plantas medicinales nativas , para el tratamiento de los diversos malestares. El Per ú cuenta con una diversidad única y rica respecto a la flora, con amplia gama de vegetales, con una biodiversidad de plantas vegetales medicinales etnobotánicas en el tr ó pico sudamericano (Rojas et al., 2021; Cerdan & Moreto, 2024; Le ó n et al., 2006). L a creciente del malestar en la humanidad y la evolución tuvo una inmensa biodiversidad en utilización en los seres humanos por la necesidad y satisfacci ó n cuanto a la medicina tradicional ( Cupido et al., 2024 ). Desde milenios , se ha utilizado las plantas medicinales para tratar diversos malestares en todo el mundo como medicina tradicional , así como su valoración de uso defendible y la biodiversidad cultural y cultura popular ( Campos, et al., 2024 ; Cupido et al., 2024 ; Heisler et al., 2015 ). Por ello , la medicina tradicional representa un conocimiento en conjunto por las pr á cticas realizadas en prevenir , diagnosticar y trata r los diversos malestares, cuya práctica es transmitid a de generación a generación (Durán & Méndez, 2010). Los conocimientos , así como saberes ancestrales activos y aprovechados en calidad de guía , enfocada a estudios de la bioprospección y etnobotánicos con aplicaciones filogenéticas como recurso medicinal en bienestar del hombre ( Cupido et al., 2024 ) . Las comunidades de las zonas rurales tienen conocimientos ancestrales y rurales, propi o s y nativos en c uanto a la utilización de plantas medicinales y las mujeres tienen mayor interacción con las plantas a comparaci ó n de los varones ( Campos, et al., 2024 ). Los vegetales tienen moléculas bioactivas , conocidas sustancias activas (Vasco et al., 2024) medicinales , que se presentan aromáticas, y que tienen sustancias bioactivas como los compuestos polifen ó licos, flavonoides , terpenos, sesquiterpenos y fenilpropanos , que poseen un potencial efecto terapéutico (Rojas et al., 2021; Cerdan & Moreto, 2024; Vasco et al., 2024), con estas caracter í sitcas encontramos a pisca pisca (Cerdan & Moreto, 2024). La p isca pisca es utilizada por algunos pobladores de zonas altoandinas del Per ú , por sus propiedades fitoqu í micas, metabolitos y sus efectos medicinales, antidiarreico y/o farmacológicos (Cerdan & Moreto, 2024; Cardenas, 2019; Vasco et al., 2024). El extracto hidroalcoh ó lico de las hojas de pi sca pisca presenta ser antimicrobiano (Cerdan & Moreto, 2024) y presenta metabolitos activos encontrados en el extracto : flavonoides, fenoles, aminoácidos, taninos, iridoides, catequinas, saponinas, glicósidos cardiotónicos, alcaloides, resaltando una mayor cuantía de alcaloides y flavonoides (Cardenas, 2019; Cerdan & Moreto, 2024). Actualmente , el interés de estudiar las nuevas especies vegetales etnobotánicas con enfoque industrial, medicinal y farma c ol ó gica, por sus propiedades de compuestos
Revista Científica Altoandina de Ciencias Agrarias 1 (1) (2025) 85 bioactivos, ha despertado interés en el ser humano, para el uso de medicina fitosanitaria; por ello , el estudio de la p isca pisca que crece en la región de Huancavelica, específicamente en provincia de Acobamba, de manera silvestre. Por ello , el objetivo es determinar los polifenoles totales del extracto hidroalcohólico de la planta medicinal de p isca pisca ( Columellia o b ovata ) en la p rovincia de Acobamba. MATERIALES Y M É TODOS Ubicación de estudio Todo el estudio se re a liz ó en el distrito de Acobamba ubicada a una altitud de 34 23 m. s. n. m., con coordenadas geográficas de longitud - 74,5694 y latitud - 12,8428 . Del mismo modo , la extracción se realiz ó en el L aboratorio de P rocesos A groindustriales 01 y los a nálisis de hidroalcohólico de p isca pisca se realizò en el laboratorio de Analisis Instrumental 02 de EPIAG, de la FCA, de la UNH. Material vegetal La planta de p isca pisca se recolect ó de la C omunidad de A llpas, de la provincia de Acobamba. Preparación de extracto hidroalcoh ó lico Las hojas de p isca pisca se deshojaron manualmente ; se secaron en u n deshidratador de alimentos de marca ( BLANIK ) y modelo ( BDA020 ) a una temperatura de 60 ºC por 24 horas; se procedieron a moler 100 g , se macer ó en botellas de color ámbar por 7 días en alcohol de 96°; este cubri ó a la muestra en su integridad en una relación de 1 a 2, y sumergido unos 10 centímetros por encima de la muestra. Durante el proceso , se agit ó el frasco periódicamente para distribuir homogéneamente el solvente en la muestra. Transcurrido el tiempo , del líquido destilado y luego destilado a presión, se eliminó el disolvente con un rotavapor rotatorio y se obtuvo un extracto suave y viscoso, el cual se concentrò en una estufa a no más de 50 °C y se transfirió a botellas de color ámbar bajo temperatura de refrigeración hasta su uso. Medi ante los protocolos descritos por Vasco et al., (2024); Surveswaran et al., (2007). Preparación de las concentraciones del extracto hidroalcohólico de la p isca pisca Se filtra el extracto hidroalcohólico macerado, luego , se llevó al equipo de rotavapor para su concentración obteniendo el extracto de consistencia semilíquida, después , con una micropipeta , se extrae 25 mL de muestra y se añaden 2,5 mL de Folin . S e control ó 2 minutos y luego se le agregó carbonato de sodio en una cantidad de 2 mL a cada muestra y se dej ó reposar 5 minutos. Luego , se le lleva a baño maría por 15 minutos a 45 °C , después , se pone en las cubetas y se lleva al espectrofotómetro para la lectura de la absorbancia . F inalmente , se llev ó a estufa a temperatura de 40 °C hasta alcanzar la deshidratación del extracto. Se pesó 100 g de extracto de hidroalcohólico de las hojas de p isca pisca, para preparar una solución madre al 3%, con 100 mL de agua destilada, y , luego , realizar diluci ó n consecutiva para concentraciones de 100 mg/kg. Siguiendo los protocolos adaptados por Surveswaran et al. (2007). Determinación de polifenoles La determinación de los contenidos de compuestos polifen ó licos denomina dos también fenoles totales, a partir del extracto de hojas de p isca pisca , se realizaron mediante los protocolos descritos por Galvez et al., (2021); Magalhaes et al., (2010); Rojas, et al., (2023). 푃표푙푖푓푒푛표푙푒푠 푡표푡푎푙푒푠 ( 휇푔 ) = ̅ . 2 . 1 Donde : ̅ = absorbancia promedio (mínimo de dos réplicas)
C . A . Bautista - Trillo , S . V . Yauricasa - Tornero , Y . Riveros - Quiñones , D . O . Sanchez - Huaycha , & O . Taype - Landeo 86 D2 = segunda dilución de muestra (100 para la primera extracción) m = pendiente de la curva de calibración (mL/µg) diseñada con el solvente usado D 1 = primera dilución de la hoja de p isca pisca (0.05 g/mL en P/V) Diseño de investigación El t ipo de investigación es básica experimental y el diseño de la investigación fue aleatorio simple. El contenido total de polifenoles se determinó utilizando el reactivo de Folin - Ciocalteu. Se cogieron de cada extracto 2 mg, colocarlo en un matraz cónico y agregar 50 m L de agua destilada y agitar en seguida . A continuación, añadir 0,5 m L de la solución anterior respectivamente y mezclar con 0,75 m L del reactivo de Folin - Ciocalteu , deponiendo en sosiego a temperatura ambiente durante 5 minutos y , luego , se agregaron 0,75 m L y a ñadir 20 % de carbonato de sodio. Se debe r em over bien y deja reposar a temperatura ambiente durante 90 minutos. Luego , se midió la absorbancia a 760 nm. El proceso se repitió tres veces de cada planta. Figura 1. Extracción y análisis del extracto hidroalcoh ó lico Materiales de laboratorio Tabla 1 . Materiales , equipos y reactivos utilizados en laboratorio Materiales Canti - dad Capaci - dad Marca/mode - lo Tubo de ensayo 2 10 mL Vaso precipitado 2 10 ml Giardino Pipeta 2 10 mL Giardino Pipeteador mecánico 1 10 ml Pipette Pump Micropipeta 1 100ul - 1000ul Boeco Germany Morteros 1 1L --- Crisoles --- --- --- Cubetas --- --- --- Equipos Canti - dad Capacidad Marca / modelo Balanza analítica 1 320 g 3S cientific /HZY - 224/323 Deshidratador de alimentos 1 1000 g Blanik /BDA020 Rotavapor 1 2L B iobase /H eating B ath Espectrofotómetro 1 --- B iobase /BK - S360 Reactivos Reactivo Folin - Ciocalteau 0,75 ml --- --- Agua destilada 50 mL --- --- Etanol de 96º 200 ml --- --- RESULT ADO S La encuesta se realiz ó en el distrito de Acobamba , de la región de H uancavelica. El 49 % de personas entrevistadas fueron los varones con edades de 30 a 66 años; mientras el 5 1 % de entrevistados fueron mujeres con edades de 23 a 71 años . Figura 2. Proporciones de v arones y mujeres encuestadas Se formularon divers o s cuestionarios agrupad o s en 11 preguntas para la entrevista a los pobladores si conocen o no conocen la planta de p isca pisca y lugar donde crece . Los m á s resaltantes fue ron el 66,67 % , que s í conoce la planta de p isca pisca ; mientras el 33,33 % no conocen. En su mayoría , esta planta crece en las punas y quebradas (Figura 3). Así, el 95,65 % utilizan en infusi ó n; mientras en la utilización para el ma l estar el 61,54 % utilizan para gripe; por lo tanto, para
Revista Científica Altoandina de Ciencias Agrarias 1 (1) (2025) 87 prevenir el 36,15 % utilizan para la gripe y uso como medicina alternativa el 79,17 % (Figura 4). El 64 % s í conoce sus propiedades medicinales , pero el 95,83 % no conoce sus propiedades nutricionales ; mientras que el 58,33 % no comunica a su m é dico su utilización de plantas medicin ales (Figura 5). Mientras el 95,83 % utilizan de manera ocasional y , en su mayoría , adquieren la planta de p isca pisca en el lugar donde crece. Figura 3 . S í conocen y lugar que crece la p isca pisca Figura 4 . Utilizaci ó n en prevención de malestar y como medicina tradicional de la p isca pisca 0 10 20 30 40 50 60 70 80 Sì conoce No conoce Quebradas Valles Punas ¿Conoce la Pisca pisca? ¿Lugar que crece? Porcentajes (%) Pobladores (Acobamba) 0 20 40 60 80 100 120 Infusiòn Harinas Agricultura Otros Gripe Còlicos estomacales Mal de aire Otros Gripe Tos y Bronquios Mal de aire Covid-19 Parasitos internos Asma Còlicos e infecciones Alternativa Complemento Utilizan en: Utilizan para el malestar Previene Uso como medicina Porcentajes (%) Pobladores (Acobamba)
C . A . Bautista - Trillo , S . V . Yauricasa - Tornero , Y . Riveros - Quiñones , D . O . Sanchez - Huaycha , & O . Taype - Landeo 88 Figura 5 . S í conocen sus propiedades medicinales y nutricionales de la planta Figura 6 . Frecuencia de uso y lugar de adquisición En la T abla 2, se aprecia los resultados alcanzados respecto al análisis de p olifenoles t otales de las hojas de p isca pisca . Tabla 2 . An á lisis de compuestos de polifen ó licos Vegetal Tipo de Análisis Resultados Pisca pisca P o lifenoles Totales 691.51 ug/g DISCUSI Ó N Las mujeres tienen m á s intervención en la entrevista , así como son las m á s interesadas en cuanto a la utilización de plantas medicinales. Respecto a Campos et al., (2024), las mujeres tienen mayor participación, asimismo , las personas mayores a 45 años de edad presentan mayor conocimiento sobre el uso de plantas medicinales . 0 20 40 60 80 100 120 No No No responde No No responde ¿Conoce sus propiedades medicinales? ¿Conoce sus propiedades nutricionales? ¿Comunica a su mèdico que utiliza plantas medicinales? Porcentajes (%) Pobladores (Acobamba) 0 20 40 60 80 100 120 Diario Semanal Ocasional Lugar mismo Mercado Ambulantes Feria ¿Con que frecuencia utiliza? ¿Dònde lo adquiere? Porcentajes (%) Pobladores (Acobamba)
Revista Científica Altoandina de Ciencias Agrarias 1 (1) (2025) 89 Heisler et al. (2015), mediante la encuesta a los pobladores, identific aron que tienen saberes populares ancestrales que se t rans mite por generación cuanto, a la utilización de plantas medicinales, como soporte a la poblaci ó n asistida y cient íf ica. Los pobladores del distrito de Acobamba utilizan la p isca pisca para prevenir y tratar los diversos malestares, como la fiebre, cólicos estomacales, tos, bronquios, mal de aire, asma y para desparasitar ( par á sitos internos ) . A simismo , en tiempos de covid - 19 , utilizaron esta planta ( p isca pisca ) para prevenir el mal y la pandemia. Los habitantes de las zonas rurales utilizan plantas medicinales que crecen en sus comunidades (Campos et al., 2024) . Por ello, e xiste una serie de vegetales que desinflaman o evitan inflamaciones en la parte presumida, por haber una estrecha re la ci ó n entre los vegetales que tienen capacidades inflamatorias y antioxidantes (Paredes et al., 2015). La p isca pisca l a ut i lizan para malestares estomacales o cólicos est o macales, que coincide con el estudio de Campos et al., (2024) con la que tratan los malestares con la Verbena officinalis y Ocimun basilicum , utilizadas sus hojas en infusiones para tratamiento de resfriado, fiebre, gripe, trastornos estomacales, malestar mental, entre otro s (Peter, 2013 ). Para Cerdan y Moreto (2024), la p isca pisca es muy utilizada por los pobladores del ande peruano por sus propiedades medicinales, ya que presenta los componentes fitoquímicos como fenoles, alcaloides, flavonoides, iridoides y taninos, glicósidos cardiotónicos, saponinas y catequinas. Para Vasco et al. (2024), ciertos vegetales son valorad o s por su potencial terapéutico, atribuido principalmente a la presencia de moléculas bioactivas, también conocidas como sustancias activas, con ciertos metabolitos con pro piedad medicinal. Los pobladores desconocen sus propiedades, pero tienen ese conocimiento ancestral , que trata los diversos malestares y no tienen la cultura de comunicar al médico sobre el uso de la planta medicinal. Asimismo, Campos et al. ( 2024 ) presenta ron un estudio respecto a la Psidium guajava que es tradicionalmente utilizada para tratar antidiarreas y cólicos intestinales. Por otro lado, las diversas plantas ( Burm. f .; Aloe vera L.; Verbena officinalis L.; Psidium guajava L. y Ocimum basilicum L. ) son referentes a trastornos digestivos y estomacales para tratar la fiebre . Por otro lado, las m á s utilizadas son las hojas y flores; asimismo , los pobladores de las comunida d es tiene n más conocimiento s emp í rico s y tradicional es que persiste n y son considerad os como patrimonio natural de la sociedad rural. A demás, algunos pobladores indicaron que la p isca pisca l a utilizan para fumigar las plantas, uso como bactericida y utilización como remojado en el pisco (destilado) y tomarlo cuando sea necesario . A simismo , sugirieron que se investigue m á s respecto a la p isca pisca. Mediante el hidroalcohólico extraído , se obtuv ieron los análisis de p olifenoles t otales en 691.51 µg/g como un potencial comp o nente bioactiva ; cierta información coindice res p ecto a Cerdan y Moreto, (2024), quienes describe n que el extracto hidroalcohólico de las hojas Columellia obovata es potencialm e nte antimicrobiano frente a Staphylococcus aureus . Respecto a Cardenas (20 1 9), esta planta , en su extracto , presenta los metabolitos activos como glicósidos cardiotónicos, taninos, alcaloides, fenoles, saponinas, catequinas, aminoácidos, flavonoides, iridoides, resaltando la mayor cuantía de alcaloides y flavonoides. León et al. (2006) menciona n que es muy importante el estudio de vegetales endémicos y tener estrategias de conservar su diversidad biológica. Mediante León et al. (2006) , s e caracterizó un total de 5509 taxones restringidos al Perú y que corresponde a un 27,9 % de la flora. Aproximadamente , el 76 % de las plantas están clasificadas como invasoras. Las especies más amenazadas el 33 % son las que están en peligro, el 18 % en peligro crítico y el 10 % como vulnerables.
C . A . Bautista - Trillo , S . V . Yauricasa - Tornero , Y . Riveros - Quiñones , D . O . Sanchez - Huaycha , & O . Taype - Landeo 90 Mediante Vasco et al. (2024), las plantas , en sus componentes , presentan sustancias fitoquímicas predominantes que incluyen aminoácidos, celulosa, ceras, lípidos, polifenoles, proteínas, resinas y aceites esenciales. Esta acumulación estratégica de compuestos protectores sirve como mecanismo biológico para defender a la planta contra diversos patógenos, como moho, hongos o bacterias . CONCLUSI ONES La planta conocida como p isca pisca fue taxonómicamente clasificada como Columellia obovata R. & P., perteneciente a la división Magnoliophyta, clase Magnoliosida, subclase Rosidae, orden Rosales, familia Columelliaceae y género Columellia . Los pobladores locales del ande peruano tiene n conocimientos ancestrales propi o s en cuanto a la utilización de las p l antas medicinales como la p isca pisca para tratar los diversos malestares y síntomas que se presentan en sus seres queridos , siendo esta planta de p isca pisca ampliamente distribuid a en el d i strito de Acobamba. El contenido de polifenoles totales en el extracto hidroalcohólico de las hojas de Columellia obovata R. & P. fue determinado mediante el método de Folin - Ciocalteu, obteniéndose un valor de 691.51 µg/g de polifenoles totales, lo cual indica un contenido significativo de compuestos fenólicos con potencial actividad antioxidante. CONFLICTO DE INTERESES Los autores , por unanimidad , declaran que no hay conflicto de intereses respecto a la publicación del presente artículo científico. REFERENC I AS Campos , R., Prado, M., Mart í nez, R., Salas, M. & Rodr í guez , L. (2024). Uso y conocimiento Tradicional de Plantas medicinales en comunidades de Villa Corzo, Chiapas, México . Bol Latinoam Caribe Plant Med Aromat. 23 (2): 257 - 272 . https://doi.org/10.37360/blacpma.24.23. 2.18 Cárdenas , E. (2019). Efecto antidiarreico del extracto hidroalcohólico de las hojas de Alnus acuminata (Kunth) “aliso” en cobayos. Ayacucho 2018. Tesis. Escuela Profesional De Farmacia Y Bioquímica. Facultad De Ciencias De La Salud. Universidad Nacional d e San Cristóbal De Huamanga. Ayacucho - Perú Cerdan , P. & Moreto, B. (2024). Efecto antimicrobiano in vitro del extracto hidroalcohólico de las hojas de Columellia obovata Ruiz & Pav. pisca pisca” frente a cepas de Staphylococcus aureus ATCC 25923 Y Escherichia coli ATCC 25922. Lima, 2023. TESIS. Escuela Académico Profesional de Farmacia y Bioquímica , de la Facultad de Farmacia y Bioquímica , de la Universidad Norbert Wiener. Lima - Perú . Cupido , M., De, J. & Cilia, V. (2024). Aproximaciones Evolutivas en Etnobotánica de Plantas medicinales y Bioprospección . Bot. ci vol.102 no.1 México Epub 13. https://doi.org/10.17129/botsci.3325 Duran, R. & Méndez, M. (2010). Biodiversidad y desarrollo humano en Yucatán. CICY PPD - FMAM, CONABIO, SEDUMA. Mérida, Yucatán , México . Heisler , E., Budò, M., Schimith, M., Badke, M., Ceolin, S. & Heck, R. (2015). Uso de plantas medicinales en el cuidado de la salud: la producción científica de tesis y disertaciones de enfermería brasileña Enfermería Global, vol. 14, núm. 3, julio, 2015, pp. 390 - 403 Universidad de Murcia , Murcia, España. León , B., Pitman, N. & Roque, J. (2006). Introducción a las plantas endémicas del Perú. Rev. Peru. biol. Número especial 13(2): 9s - 22s. Facultad de Ciencias Biológicas UNMSM. ISSN 1561 - 0837 Magalhaes LM, Santos F, Segundo MA, Reis S, Lima JLFC. (2010). Rapid microplate high - throughput methodology for assessment
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